Kidney Int ：肾小管生物钟调节功能障碍导致糖尿病病变肾糖异生增强和加重高血糖

背景及目的：在糖粪便病病患里，肾脏通过增加原粪便里的重吸收和大幅提高内侧小管里的糖异生来加强糖粪便病心力衰竭的频发。然而，低血糖技术水平的慢性升高确实反过来导致糖粪便病哮喘(DN)，这是糖粪便病最致使的并发症之一，其特征是肾小球、肾小管和肾脏肺部损毁。虽然代谢持续性是糖粪便病哮喘频发和转变的主要诱因，但在大多数糖粪便病病患里，心力衰竭本身并会导致肾新功能不全。这表明，合并症或周围环境、遗传或微小遗传的变异确实是启动和/或加速进展DN所要能的。心率是一种普遍存在的分子计时新功能，它将蛋白质、秘密组织和系统的微生物新功能与24同一时间的周围环境周期实时。局部心率驱动蛋白质类改型和秘密组织特有的节律，它们的嗜睡与一系列哮喘的发病和/或进展有关。然而，糖粪便病病患肾脏里内在心率的病理认知主导作用仍不清楚。

作法律条文：为了解决这个问题，我们用链胍佐霉菌抑止了足蛋白质(cKOp大鼠)或肾小管(cKOt大鼠)里缺乏昼夜节律转录调节因子BMAL1的大鼠患I改型糖粪便病。

大鼠模改型制备：8周龄Bmal1lox/lox/Nphs2-RTTA/LC1大鼠(cKOp大鼠)或8周龄Bmal1lox/lox/Pax8-RTTA/LC1大鼠(cKOt大鼠)经DOX(饮水里2 mg/ml)解决问题2再一，Bmal1(ARNTL)突变失活。他们的对照组(Bmal1lox/lox大鼠)遵从相同的DOX外科手术。在DOX外科手术结束一再一，通过肺部切除链胍佐霉菌(STZ，50 mg/kg体重，每日5天)抑止I改型糖粪便病。溶媒解决问题的大鼠遵从PBS的溶媒切除。所有实验外在再次一次切除STZ或溶媒8再一实时进行。在所有实验里，从ZT9处死的大鼠身上采集秘密组织和血液(ZT-Zeitgeber时间单位；ZT0是开灯时间，ZT12是关灯时间)。

代谢笼：大鼠被饲养在性状代谢笼子里(Tecniplast，西西里岛)。在4天的适应期后实时进行24同一时间的粪便液收集。

血清和粪便液化学合成测：用Vaudois里心医院临床实验室(LCC)测粪便和血清Na+、K+、Ca2+、Mg2+、磷酸盐、肌酐、、粪便酸和粪便素浓度及电解质。用酸碱仪(Metrohm)测粪便液pH参数。用到EPOC血液探头(摩托罗拉医疗)测量动-静脉混合血的血液pH参数和血气。粪便铵测换用Berthelot法律条文。粪便可校准酸测换用Chan25作法律条文。换用放射免疫法律条文(DPC)测血清醛固酮技术水平。用Mercodia公司的试剂盒测血清抗生素。

耐量实验(GTT)：苦行15同一时间后，给空白对照组和cKOt大鼠肺部切除(1g/kg体重)。分别于切除之前(t=0)、切除后15、30、60、90、120、180min，用低血糖读数仪测低血糖。

抗生素耐量实验(ITT)：苦行4h后，给对照组和cKOt大鼠肺部切除0.5U/kg体重的重新组建人抗生素(人重新组建抗生素，Sigma)。分别于抗生素切除之前(t=0)、抗生素切除后15、30、45、60、90、120、150、180min测低血糖。如果低血糖调低2 mm以下，则通过肺部切除30毫克复仇大鼠，并将其排除在研究之外。

RNA测序技术：RNA-SEQ按照Ansermet等人在6.Mus Musculus里的描述实时进行。用到GRCm38.92突变评注。用到TMM标量对突变计数器实时进行定标，并用到LIMMA R包内27里的“CPM”函数将其下式转换为每百万计数器(CPM)。计算了KO和Ctrl动物在原于(PBS)和解决问题(STZ)条件下的区别表达以及两者之间的相互主导作用。对于这三种比较里的每一种，可选择FDR

结果：在患有糖粪便病的cKOp和cKOt大鼠里，心率新功能障碍与糖粪便病哮喘的频发没有连续性。然而，与链胍佐霉菌外科手术的对照组相对于，患有糖粪便病的cKOt大鼠展现出出加心力衰竭加重，粪便里排泄增加，多粪便增加，肾脏肥大更明显。mRNA和蛋白质表达研究看出，与糖粪便病对照组大鼠相对于，cKOt糖粪便病大鼠肾脏里的糖异生捷径显著强化。CKOt糖粪便病大鼠的转录研究和新功能研究确认了直接或间接影响糖异生捷径的多种新功能的变异。

结论：我们证明了内在肾小管心率新功能障碍可通过强化肾内侧小管的糖异生而加重糖粪便病心力衰竭，实质性强调了心率调节在糖粪便病病患里的效用。

原文出处：

Ansermet C， Centeno G， Bignon Y，et al.Dysfunction of the circadian clock in the kidney tubule leads to enhanced kidney gluconeogenesis and exacerbated hyperglycemia in diabetes.Kidney Int 2021 Nov 24